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原理:
組織分離法是操作最簡便、最常用,但是樣品最容易被汙染的實驗方法。其是利用子實體組織來分離獲得純菌絲的方法,組織分離屬無性繁殖法,染色體沒有經過重組,因此基本上可保留親本的生物特徵。
器材與材料:
新鮮菇體*1朵
刀子、鑷子、酒精燈、75%酒精
PDA培養基斜面試管
無菌操作台
恆溫培養箱
步驟:
1.挑選菇種:應挑選生長健壯、菌齡適中、無蟲病害、具有該品種優良性狀之菇體做為種菇。
2.菇體消毒:
2.1:將菇柄基部切除
2.2:浸於75%酒精對菇體表面進行消毒(1-2min)
3.組織分離:
3.1:刀子經火焰滅菌,於菇柄中部縱劃一刀,用鑷子掰開菇柄。
3.2:在菇柄交接處挑取一小塊組織(2~5mm),打叉的地方不能取,因有用酒精消毒過,菌體基本已經死光了,打勾是最好的地方!
3.3:迅速移接到PDA斜面試管,要接種在打勾處,1號叉叉無養分樣品會枯萎,2號叉叉水氣堆積處,會使樣品腐爛。
4.培養:將試管放入培養箱中,適溫培養(香菇25度,金針菇16-20度),待組織塊長出菌絲且無無染即為純菌種。
問題:
除了組織分離法,還有哪些方法可以用來製備食藥用真菌菌種?
答:
子實體栽培: 以段木或含木屑與商業化基質之太空包進行人工培養。
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其他補充資料:
PDA培養基簡介與製作
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